¿Cuál es la profundidad de campo en un microscopio?

La profundidad de campo (DOF) de un microscopio es el rango de distancias desde la lente del objetivo en el que los objetos aparecen nítidos. Está determinada por la apertura numérica (NA) de la lente del objetivo y la longitud de onda de la luz utilizada.

El DOF es inversamente proporcional al NA, lo que significa que un objetivo de NA más alto tiene un DOF más pequeño. Esto se debe a que un objetivo de mayor NA tiene un cono de luz más estrecho, lo que significa que enfoca un área más pequeña de la muestra.

El DOF también es inversamente proporcional a la longitud de onda de la luz, lo que significa que una longitud de onda de luz más corta tiene un DOF más pequeño. Esto se debe a que las longitudes de onda de luz más cortas se difractan más fácilmente, lo que significa que se extienden más al pasar a través de la lente del objetivo.

El DOF de un microscopio es importante porque determina el grosor de la muestra que se puede ver con un enfoque nítido. Una muestra que sea más gruesa que el DOF aparecerá borrosa o desenfocada.

El DOF se puede aumentar utilizando una lente de objetivo de NA más baja o utilizando una longitud de onda de luz más larga. Sin embargo, esto también disminuirá la resolución del microscopio. Por lo tanto, es importante encontrar un equilibrio entre DOF y resolución al elegir un objetivo para una aplicación particular.

El DOF de un microscopio se puede calcular mediante la siguiente fórmula:

$$ DOF =\frac{2(n/NA)^2}{\lambda} $$

Dónde:

* DOF es la profundidad de campo en micrómetros

* n es el índice de refracción del medio de inmersión

* NA es la apertura numérica de la lente del objetivo.

* λ es la longitud de onda de la luz en micrómetros